PNRR - Post Doc

Job title: PNRR - Post Doc

Nell’ambito del Piano Nazionale di Ripresa e Resilienza (PNRR), l’IRCCS Istituto Clinico Humanitas ha avvitato le procedure di selezione pubblica per il reclutamento nell’ambito dei progetti di Valorizzazione e potenziamento della ricerca biomedica del SSN.

RIFERIMENTO COMMESSA E CUP:

Numero progetto: PNRR-MCNT2-2023-12378017

CUP: E27G24000030006

TITOLO E BREVE DESCRIZIONE DEL PROGETTO:

Utilizzo della tecnologia degli oligonucleotidi modulatori dello splicing per manipolare gli eventi di splicing alternativo aberrante nella terapia della sclerosi multipla (Exploiting the Splice-Switching Oligonucleotides technology to modulate aberrant alternative splicing events in multiple sclerosis therapy)

Lo splicing alternativo (AS) è un meccanismo post-trascrizionale che porta alla produzione di mRNA diversi a partire da singoli geni. Una deregolazione del meccanismo di splicing alternativo è stata implicata in molte malattie, tra cui la sclerosi multipla (SM), una malattia autoimmune cronica del sistema nervoso centrale caratterizzata da linfociti T autoreattivi. Sebbene la deregolazione dello splicing alternativo sia stata dimostrata nella SM, non sono ancora state sviluppate strategie terapeutiche mirate a questo meccanismo alterato. Il ripristino dell'equilibrio tra le isoforme deregolate dello splicing potrebbe rappresentare una strategia terapeutica innovativa nelle cellule immunocompetenti. In questo contesto, il progetto si propone di:

1. esplorare il profilo dello splicing alternativo nei linfociti T sia di pazienti affetti da SM sia di controlli per evidenziare gli eventi di splicing alternativo deregolati;
2. modulare significativamente gli eventi di splicing alternativo fortemente deregolati nei linfociti T utilizzando oligonucleotidi antisenso per lo switch dello splicing;
3. valutare la potenziale patogenicità degli eventi di splicing alternativo identificati in termini di traduzione di potenziali neoepitopi.

Profilo professionale e breve descrizione delle attività richieste:

Ruolo: Post Doc

Attività:

Il candidato selezionato avrà un ruolo chiave nello sviluppo di questo progetto, le principali attività previste includeranno:

• Profilazione dello splicing alternativo:
  • Isolamento di RNA: Isolamento di RNA di alta qualità da linfociti T di pazienti con SM e controlli sani.
  • Sequenziamento RNA-seq: Esecuzione di esperimenti di sequenziamento RNA-seq ad alta profondità per identificare gli eventi di splicing alternativo differenzialmente espressi nei due gruppi.
• Validazione degli eventi di splicing:
  • PCR quantitativa (qPCR): Validazione degli eventi di splicing identificati tramite RNA-seq utilizzando qPCR.
  • Western blotting: Analisi dell'espressione delle isoforme proteiche derivanti dagli eventi di splicing alternativi.
• Modulazione dello splicing alternativo:
  • Design di oligonucleotidi antisenso: Progettazione di oligonucleotidi antisenso specifici per modulare gli eventi di splicing alternativi di interesse.
  • Trasfezione di linfociti T: isolamento di linfociti T da pazienti con SM e controlli sani. Trasfezione di linfociti T con gli oligonucleotidi antisenso e valutazione dell'efficacia di modulazione dello splicing.
• Valutazione della patogenicità:
  • Saggi immunoenzimatici (ELISA): Valutazione della reattività degli anticorpi contro i potenziali neoepitopi nei pazienti con SM.

Titoli di Studio richiesti: Dottorato di ricerca in ambito di biologia cellulare, biologia molecolare e/o genetica

Competenze tecniche:

• Solida esperienza in tecniche di biologia molecolare e cellulare, tra cui isolamento di RNA, qPCR, Western blotting, trasfezione cellulare, sequenziamento Sanger, microscopia.
• Ottima conoscenza delle metodiche di preparazione delle libraries per sequeziamento di RNA (RNA-seq bulk, e single cell sequencing).
• Esperienza nella progettazione e utilizzo di oligonucleotidi antisenso.
• Capacità di lavorare in modo indipendente e in team.
• Ottime capacità comunicative sia scritte che orali, per presentare i risultati della ricerca.

Requisiti preferenziali di scelta del candidato:

• Solida esperienza pluriennale nel ruolo di ricercatore/a in biologia molecolare e cellulare;
• Comprovata capacità di progettazione e conduzione di esperimenti di biologia molecolare;
• Conoscenza approfondita della lingua inglese.

Humanitas sulla base dei profili ricevuti, attiverà nei termini indicati dal presente avviso, il processo di selezione invitando i candidati idonei a partecipare ai colloqui di selezione, previa verifica del cv e dei titoli, che si terranno in presenza o in modalità telematica.

La commissione di selezione, composta dal Responsabile del Progetto e dalla Direzione Risorse Umane, si farà carico della valutazione complessiva delle candidature ricevute.

L’avviso è rivolto a candidatə nel rispetto del Dlgs 198/2006 e dei Dlgs 215/2003 e 216/2003.

Le persone interessate sono invitate a leggere l'informativa privacy ex artt. 13 e 14 del Reg. UE 2016/679.

Data pubblicazione avviso: 11 / 12 / 2024

Data di inserimento prevista: 31 / 12 / 2024